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蛋白质的表达、分离、纯化实验

标签: 蛋白质 表达 分离 纯化

蛋白质表达、分离、纯化可以:(1)探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理;(2)供作结构与功能的研究;(3)作为催化剂、营养剂等。

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实验方法原理

携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌BL21中,在 37℃,IPTG诱导下,超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白,该蛋白可用一种通过共价偶连的次氨基三乙酸(NTA)使镍离子(Ni2+)固相化的层析介质加以提纯,实为金属熬合亲和层析(MCAC)。蛋白质的纯化程度可通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。

实验材料

大肠杆菌BL21

试剂、试剂盒

LB液体培养基 氨苄青霉素 Washing  BufferElution  BufferIPTG 蒸馏水 胰蛋白胨 酵母粉 氯化钠

仪器、耗材

摇床 离心机 层析柱 离心管 移液枪 枪头盒 烧杯 玻璃棒


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